۴′،۶-دیآمیدینو-۲-فنیلیندول دیهیدروکلراید (DAPI·2HCl) یک رنگزای فلورسانس کلاسیک برای شناسایی و رنگآمیزی DNA است که به شیار کوچک (Minor Groove) دورشتهایهای غنی از AT متصل میشود. این ترکیب در میکروسکوپی فلورسانس، فلوسایتومتری و ارزیابی زیستمولکولی هسته و میتوکندری کاربرد گستردهای دارد. نمک دیهیدروکلراید به دلیل حلالیت مناسب در آب و پایداری خوب، فرم متداول مصرف در آزمایشگاههای سلولی و مولکولی است.
ویژگیها و خواص
| ویژگی | توضیحات |
|---|---|
| نام شیمیایی | ۴′،۶-دیآمیدینو-۲-فنیلیندول دیهیدروکلراید (DAPI·2HCl) |
| فرمول مولکولی | C16H17Cl2N5 |
| جرم مولی | ≈ 350 g/mol |
| شکل ظاهری | پودر کریستالی سفید تا زرد کمرنگ |
| حلالیت | محلول در آب و DMSO؛ نامحلول در حلالهای غیرقطبی |
| ویژگی بارز | اتصال انتخابی به DNA (Minor Groove) و گسیل آبیِ درخشان |
| ویژگی طیفی | طولموج تحریک ~350–360 nm ؛ گسیل ~450–470 nm (در اتصال به DNA) |
کاربردها
- رنگآمیزی هسته سلول در میکروسکوپی فلورسانس (Fixed و Permeabilized؛ در برخی شرایط زنده)
- فلوسایتومتری، شمارش سلولی و سنجش زنده/مرده همراه با رنگهای مکمل
- کو-رنگآمیزی با رنگهای سبز/قرمز (FITC, TRITC, Alexa Fluor) برای چندکانالهسازی
- تهیه محلولهای استوک پایدار برای پروتکلهای ایمیجینگ با تکرارپذیری بالا
ایمنی و نگهداری
- رنگزای متصلشونده به DNA؛ احتمال اثرات موتاژنی—از تماس پوستی/چشمی و استنشاق گردوغبار خودداری شود
- استفاده از PPE کامل: دستکش، عینک ایمنی، روپوش؛ کار در هود شیمیایی
- محافظت از نور؛ نگهداری بهصورت پودر در ۲–۸°C یا محلولهای استوک الیکوتشده در −۲۰°C
- دفع پسماند طبق دستورالعمل مواد شیمیایی خطرناک و مقررات محلی
نتیجهگیری
این ترکیب بهعنوان استاندارد طلایی رنگآمیزی DNA، سیگنال آبی پُرنوری فراهم میکند و برای تصویربرداری هسته، آنالیز چرخه سلولی و آزمونهای زیستمولکولی گزینهای قابلاعتماد است—به شرط رعایت دقیق نکات ایمنی و نگهداری.

